草帽海贼团的成员自然是游戏中的核心角色。路飞、奈美、佐罗、山治、罗宾、弗兰奇、甚平等主角团成员都已确认会出现在游戏初始版本中。这些角色不仅拥有各自的特色技能，还完美还原了原作中的战斗风格。

除了主角团外，游戏还收录了许多重要反派角色。比如鱼人阿龙、雷神艾尼路等经典反派都将登场。这些角色在原著中都有着举足轻重的地位，在航海王壮志雄心中也保留了他们的独特个性和强大实力。

游戏中的角色获取方式分为常驻卡池和限定卡池。普通角色可以通过常驻招募获得，而像鹰眼米霍克这样的顶级强者则只能在限定卡池中抽取。限定卡池会定期轮换，给玩家更多收集强力角色的机会。